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技術(shù)文章

單糖分析指南,Ludger可以提供單糖分析服務(wù)

技術(shù)文章

單糖分析指南如下,Ludger公司可以提供單糖分析的技術(shù)服務(wù)


單糖分析是監(jiān)管機(jī)構(gòu)在生物制藥表征的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格指南中提出的一個(gè)要求。單糖分析可用于在藥物開發(fā)的各個(gè)階段,作為確定糖基化(N-連接和/O-連接)類型和糖基化程度的方法。它也可以用于證明在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中多批次之間大量釋放的質(zhì)量控制檢測(cè)的一致性。


較廣泛使用的單糖分析方法如下:

    1. 通過(guò)輕度酸水解放糖蛋白上的單糖。

    2. 釋放的單糖用2-氨基苯甲酸(2-AA)進(jìn)行熒光標(biāo)記。

    3. 用HPLCUHPLC柱對(duì)2-AA標(biāo)記的單糖進(jìn)行定量分析。


LudgerTag?單糖釋放和標(biāo)記試劑盒(貨號(hào):LT-MONO-96)可以提供所有需要的從糖蛋白釋放中性和氨基單糖以及2-AA標(biāo)記的功能。該試劑盒包含有96個(gè)糖蛋白樣品(可用于每個(gè)大約50 μg的糖蛋白)的試劑和材料。


它包括含6個(gè)單糖單獨(dú)混合的定量標(biāo)準(zhǔn)品。該單獨(dú)混合標(biāo)準(zhǔn)品能校準(zhǔn)試驗(yàn)儀器,從而可以定量的確定糖蛋白的單糖組成。


我們建議用五點(diǎn)校準(zhǔn)曲線為此標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn),這在試劑盒說(shuō)明書中有詳細(xì)說(shuō)明。


木糖是一種通常存在于植物和昆蟲的單糖,但不是哺乳動(dòng)物或酵母表達(dá)載體的單糖。此試劑盒也包含了木糖。它可以被用來(lái)作為內(nèi)參使用(即在標(biāo)記之前加入到每個(gè)樣品)。這樣能補(bǔ)償樣品在處理過(guò)程中發(fā)生的任何移液或樣品制備誤差的損失。我們還建議純化糖肽標(biāo)準(zhǔn)品,是LudgerBioQuant?*量化的標(biāo)準(zhǔn)品,作為陽(yáng)性對(duì)照。


這個(gè)定量標(biāo)準(zhǔn)品(貨號(hào):BQ-GPEP-A2G2S2-10U)是一個(gè)復(fù)雜的N-連接雙觸角聚糖,終止于兩個(gè)N-乙酰氨基酸。使用此標(biāo)準(zhǔn)品將可以檢查聚糖的釋放、標(biāo)記和回收的有效性,并可以增加您的單糖測(cè)定準(zhǔn)確性。


根據(jù)您實(shí)驗(yàn)室的需求,我們提供兩種色譜柱對(duì)標(biāo)記的單糖進(jìn)行分析。如果使用液相色譜法(HPLC),我們建議使用LudgerSep?R2柱(貨號(hào): LS-R2-4.6×150),它能有效的分離在大部分N-連接和O-連接聚糖中存在的七個(gè)主要單糖。如果使用超液相色譜(UHPLC),我們建議使用LudgerSep?UR2柱(貨號(hào): LS-UR2-2.1x50),它可在8分鐘內(nèi)分離每個(gè)樣本。參見圖1



1:用LudgerSep UR2 UHPLC色譜柱(貨號(hào): LS-UR2-2.1x50)分離的2-AA標(biāo)記單糖標(biāo)準(zhǔn)品。以下單糖都在8分鐘內(nèi)出峰:氨基葡萄糖(GlcN),氨基半乳糖(GalN),半乳糖(Gal),甘露糖(Man),葡萄糖(Glc),木糖(Xyl)和巖藻糖(Fuc



單糖分析相關(guān)產(chǎn)品

商品型號(hào)

英文品名

中文品名

包裝

LT-MONO-96

Monosaccharide Release & Labeling Kit

單糖釋放和標(biāo)記試劑盒

2 Reaction Sets

LS-R2-4.6x150

LudgerSep R2HPLC Column

R2 HPLC 色譜柱

4.6 x 150 mm

LS-UR2-2.1x50

LudgerSep uR2UHPLC Column-monosaccharide

uR2 UHPLC 色譜柱-單糖

2.1x 50 mm

LS-R-BPTX10

LudgerSepR BPT Solvent

10BPT溶液

50ml

CM-MONOMIX-10

Mix of six monosaccharide quantitative standards (glucosamine, galactosamine, galactose, mannose, glucose/dextroseand fucose )

6個(gè)單糖混標(biāo)準(zhǔn)品 (葡萄糖胺, 半乳糖胺, 半乳糖, 甘露糖,葡萄糖和巖藻 )

10 nmol

BQ-GPEP-A2G2S2

A2G2S2 glycopeptide standard

A2G2S2 糖肽標(biāo)準(zhǔn)品(用于單糖釋放和標(biāo)記過(guò)程)

10 μg



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